目的:探讨Kindlin-2对小鼠子宫发育及雌鼠生育能力的影响及其作用机制.方法:利用Cdh16-Cre工具鼠和Kindlin-2flox/flox小鼠构建在子宫内膜中特异性敲除Kindlin-2的小鼠模型,观察敲除Kindlin-2对雌鼠子宫内膜发育和生殖力的影响.在子宫内膜癌细胞系HEC-1和Ish中分别进行高表达和敲低Kindlin-2的实验,检测雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路的激活变化,并且提取特异性敲除Kindlin-2的雌鼠(实验组,基因型为Cdh16-Cre;Kindlin-2flox/flox)和未特异性敲除Kindlin-2的雌鼠(对照组,基因型为Kindlin-2flox/flox)子宫蛋白,每组包含6～8只小鼠,重复3次独立实验,检测mTOR信号通路和Hippo信号通路关键分子的蛋白水平.结果:成功构建了子宫内膜特异性敲除Kindlin-2的小鼠模型,通过鼠尾聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)、Western blot、免疫组织化学染色(immunohistochemistry,IHC)等方法鉴定和验证Kindlin-2在小鼠子宫中的敲除效率.子宫内膜特异性敲除Kindlin-2的雌鼠与对照组相比体质量减轻、生殖能力严重受损、出生仔鼠数量减少,但出生仔鼠中雌鼠和雄鼠的比例未发生改变,通过苏木精-伊红染色实验观察表明实验组子宫内膜发育不完整、子宫壁厚度变薄.机制方面,子宫内膜癌细胞系

作者：张京；宋佳桂；王振斌；龚玉清；王天卓；周津羽；战军；张宏权

来源：北京大学学报（医学版） 2022 年 54卷 5期