目的 研究p53异构体Δ133p53在内质网应激诱导细胞凋亡过程中的作用,探讨其对自噬的调节.方法 应用p53缺失型1299细胞和Δ133p53 1299细胞为模型,利用Tunicamycin (20 μ,g/ml)诱导的内质网应激导致细胞凋亡；采用免疫荧光方法分别进行凋亡蛋白M30检测以及采用活细胞染料acetoxymethyl(AM)/碘化丙啶(propidium iodide,PI)对活细胞/死细胞检测以评价细胞凋亡.转染GFP-LC3质粒并通过自噬体点状结构计数以及Real-time PCR方法检测自噬相关基因的表达检测细胞自噬体的形成.结果 在内质网应激条件下,Δ133p53 1299细胞比1299(p53-/-)对细胞凋亡的诱导更加敏感.与1299(p53-/-)细胞相比,在Tunicamycin诱导下,在Δ133p53 1299细胞中,凋亡蛋白M30高表达并且死细胞数量明显增多.在对自噬的调节方面,在内质网应激条件下,Δ133p53显著提高细胞自噬的形成.与1299(p53-/-)细胞相比,Δ133p53 1299细胞中自噬体点状结构计数增加较多,并且自噬相关基因ATG5的表达显著上调.结论 在内质网应激诱导细胞凋亡过程中,Δ133p53通过诱导细胞自噬而促进细胞凋亡.
作者：孙华银；任锋；刘凯；江瑛；石英；李莉；刘秀红；娄金丽；段钟平；陈德喜
来源：北京医学 2011 年 33卷 12期
