目的:观察二硫苏糖醇 (DTT) 诱导人正常肝细胞LO2发生内质网应激的过程中自噬相关指标表达的变化及其对细胞凋亡的影响.方法:采用2.0 mmol/L DTT处理LO2细胞0、6、12和24 h, 诱导细胞发生内质网应激;real-time PCR及Western blot检测葡萄糖调节蛋白78 (GRP78) 、蛋白激酶R样内质网激酶 (PERK) 、活化转录因子4 (ATF4) 、C/EBP同源蛋白 (CHOP) 、自噬相关基因12 (Atg12) 、自噬相关基因5 (Atg5) 和微管相关蛋白1轻链3 (LC3) mRNA及蛋白水平的变化;流式细胞术检测细胞凋亡情况;透射电镜观察自噬小体的产生情况.采用400 nmol/L的雷帕霉素预处理LO2细胞1 h, 再给予2.0 mmol/L的DTT处理24 h, 观察雷帕霉素预处理对细胞凋亡的影响.结果:2.0 mmol/L DTT处理LO2细胞6、12和24 h后, 细胞中GRP78、PERK、ATF4、CHOP、Atg12、Atg5和LC3的mRNA及蛋白水平较0 h组显著上调 (P <0.05) ;同时LC3Ⅱ/LC3Ⅰ也较0 h组显著增高 (P <0.05) ;透射电镜检测发现, DTT处理6、12和24 h后, 细胞中均可见自噬小体的产生;流式细胞术检测发现, DTT处理细胞6、12和24 h后, 细胞凋亡较0 h组显著增加;而经自噬诱导剂雷帕霉素预处理后, DTT诱导的细胞凋亡显著下降 (P<0.05) .结论:内质网应激可诱导自噬的发生, 而雷帕霉素预处理可在一定程度

作者：郑璐；韩冰；汤雷；田甜；蔡爽；余蕾；马子华；杨婷；杨勤；谢汝佳

来源：中国病理生理杂志 2019 年 35卷 2期