目的：研究自噬对氧化低密度脂蛋白（ oxidized low-density lipoprotein ，ox-LDL）所致巨噬细胞凋亡的影响，并探讨可能的分子机制。方法：体外培养RAW264．7巨噬细胞，分别给予3-甲基腺嘌呤（3-methyladenine，3-MA；3 mmol／L）、雷帕霉素（rapamycin，Rap；1μmol／L）或4-苯丁酸（4-phenylbutyric acid，PBA；4 mmol／L）预处理1 h，再加入ox-LDL（100 mg／L）继续培养12 h。分别采用MTT法和Annexin V-FITC双染法检测细胞活力和凋亡情况；相应试剂盒测定培养液乳酸脱氢酶（ lactic dehydrogenase ，LDH）和细胞内caspase-3活性；采用Western blot法检测自噬标志分子beclin-1和内质网应激标志分子葡萄糖调节蛋白78（ glucose-regulated protein 78，GRP78）及促凋亡蛋白C／EBP同源蛋白（ C／EBP homologous protein ，CHOP）表达的变化；采用激光共聚焦显微镜观测细胞内微管相关蛋白1轻链3（microtubule-associated protein 1 light chain 3，LC3）的变化。结果：ox-LDL处理可显著降低巨噬细胞活力，并增加LDH漏出、凋亡率及caspase-3活性；ox-LDL对细胞的上述损伤作用可被自噬抑制剂3-MA促进而被自噬诱导剂雷帕霉素拮抗。 ox-LDL诱导巨噬细胞自噬反应，表现为beclin-1表达上调，LC3颗粒化显著；ox-

作者：田华；马守原；康攀攀；郝奇；焦鹏；邵夏炎；徐晓燕；秦树存；姚树桐

来源：中国病理生理杂志 2016 年 32卷 12期