目的 评价PCR-探针熔解分析法(probe melting analysis assay,PMAA)检测结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)对利福平(rifampin,RFP)耐药性的临床应用价值.方法 采用常规比例法和PCR-PMAA对512株MTB临床分离株进行RFP药敏试验,并进行RFP耐药相关基因rpoB DNA测序.结果 以常规比例法为标准,PCR-PMAA检测RFP耐药性的敏感性、特异性分别为97.5％、96.2％,阳性和阴性预测值分别为94.1％、98.4％、符合率及约登指数分别为96.7％及0.93.193株比例法和PCR-PMAA两法检测均耐药的菌株,经DNA测序证实174株rpoB基因RFP耐药决定区(RFP resistance determining region,RRDR)发生单位点密码子突变,19株RRDR发生不同组合型的双位点密码子联合突变；5株比例法检出耐药、PCR-PMAA敏感的菌株,DNA测序rpoB基因未见突变;12株比例法检出敏感、PCR-PMAA耐药的菌株,DNA测序证实其中7株511位点密码子突变,5株533位点密码子突变；302株两法检测均敏感菌株DNA测序结果未见rpoB耐药相关的基因位点突变.PCR-PMAA检测MTB临床分离株rpoB基因突变结果与DNA测序结果完全一致.结论 PCR-PMAA法能高效检出MTB对RFP耐药的相关基因突变,用于检测MTB对RFP耐药性的敏感性高、特异性强,方法简便、快速、价廉,具有良好的临床应用前景.|

作者：李国利；李庆阁；王倩；张灵霞

来源：北京医学 2012 年 34卷 9期