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目的:利用基因工程技术获得有较高生物学活性的睫状神经营养因子(CNTF)蛋白.方法:应用反转录PCR技术直接扩增出人CNTF cDNA,克隆入pUC19载体中,用双脱氧法进行手工序列分析,构建表达菌株pBV220-CNTF/DH5α.表达的蛋白质得到纯化,用鸡胚背根节无血清培养法检测表达蛋白生物学活性.结果:所克隆的CNTF基因序列与文献报道完全一致,pBV220-CNTF/DH5α能特异表达分子量大约为26 000的蛋白质,表达量约为菌体总蛋白量的35

作者:刘建香;马红雨;朱美才;蔡庆

来源:白求恩医科大学学报 2001 年 27卷 6期

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作者:
刘建香;马红雨;朱美才;蔡庆
来源:
白求恩医科大学学报 2001 年 27卷 6期
标签:
睫状神经营养因子 高效表达 纯化 生物活性
目的:利用基因工程技术获得有较高生物学活性的睫状神经营养因子(CNTF)蛋白.方法:应用反转录PCR技术直接扩增出人CNTF cDNA,克隆入pUC19载体中,用双脱氧法进行手工序列分析,构建表达菌株pBV220-CNTF/DH5α.表达的蛋白质得到纯化,用鸡胚背根节无血清培养法检测表达蛋白生物学活性.结果:所克隆的CNTF基因序列与文献报道完全一致,pBV220-CNTF/DH5α能特异表达分子量大约为26 000的蛋白质,表达量约为菌体总蛋白量的35