尿酸氧化酶(urate oxidabe,Uricase,EC.1.7.3.3)是一种能将尿酸氧化为尿囊素的蛋白酶.合成黄曲霉(Aspergillus flavus)尿酸氧化酶基因,构建表达载体pET43.1a/uox,重组质粒经双酶切鉴定和序列分析,证明插入序列正确,转化到大肠杆菌(Escherichia coli)JM109,菌株经诱导表达尿酸氧化酶蛋白,目的蛋白经过超声破碎,经检测以可溶性蛋白为主;菌体经超声破碎后,上清经过阴离子柱和阳离子柱两步纯化,得到尿酸氧化酶纯品,纯品以分光光度法进行体外酶活性测定.结果显示:尿酸氧化酶在大肠杆菌中获得高效表达,目的蛋白占菌体总蛋白的50
作者:朱蕾;王庆民;武国栋;薛彤彤;孙丽霞;王晶翼
来源:中国生物工程杂志 2011 年 31卷 4期