目的:构建以减毒鼠伤寒杆菌为载体的甲肝疫苗候选株,并证明其免疫源性.方法:将甲型肝炎病毒编码区cDNA插入高效表达质粒pBV221.转化大肠杆菌DH5α.用核酸探针和限制性内切酶筛选和鉴定阳性克隆.将阳性重组质粒用电转移法转化减毒鼠伤寒杆菌BRD509.用抗生素平板筛选法筛选出转化成功的伤寒杆菌,用温度诱导法诱导目的基因在伤寒杆菌中表达.结果:蛋白质印迹法(Western blotting)和酶联免疫吸附测定(ELISA)检测表明,表达蛋白可与人抗甲型肝炎IgG发生特异性反应.用此伤寒杆菌口服或腹腔注射免疫小鼠,小鼠血清检测到抗甲型肝炎病毒的抗体.结论:以减毒鼠伤寒杆菌为载体的甲肝疫苗构建成功,并可在体内外产生免疫应答.
作者：胡玉琳；牛俊奇；苏秀芬
来源：吉林大学学报(医学版) 2004 年 30卷 3期
