背景:幽门螺杆菌(H.pylori)是慢性活动性胃炎和消化性溃疡的重要致病菌,以减毒鼠伤寒沙门菌为载体构建活疫苗已成为探索新型H.plori疫苗的重要途径.目的:构建携带H.Pylori热休克蛋白B亚单位(hspB)基因的重组活减毒鼠伤寒沙门疫苗菌.方法:应用基因工程技术将1 640 bp的hspB基因克隆入原核表达质粒pTrc99A.对重组质粒进行序列测定,并将测序结果与基因文库中H.Pylori-hspB的基因和蛋白序列进行BLAST分析,再将重组质粒导入活减毒鼠伤寒沙门菌SL3261.结果:重组质粒经聚合酶链反应(PCR)和双酶切,证实构建了携带hspB基因的重组原核表达质粒pTrc99A-hspB,后者成功转化活减毒鼠伤寒沙门菌SL3261.所构建的重组质粒pTrc99A-hspB中所含的H.pylori-hspB与基因文库中H pylori-hspB基因和蛋白的同源性均为97
作者:李国庆;焦志勇;陈旻湖;朱森林;陈洁;胡品津
来源:胃肠病学 2003 年 8卷 1期