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目的:研究电离辐射对乳腺癌细胞和乳腺癌干细胞活性氧(ROS)、凋亡和周期分布的影响,探讨乳腺癌干细胞辐射抵抗产生的机制。方法:采用含多种生长因子的无血清培养基悬浮培养人乳腺癌 MCF-7细胞系,分为乳腺癌细胞 MCF-7组、乳腺癌干细胞 MCF-7-S组、MCF-7+8 Gy组和 MCF-7-S+8 Gy组。8 Gy电离辐射后4~24 h,分别采用2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)、AnnexinⅤ-FITC/PI和 PI染色,流式细胞术检测细胞中 ROS水平、凋亡细胞百分比和各细胞周期时相细胞百分比。结果:含多种生长因子无血清悬浮培养7 d后,形成数百个细胞聚集而成的乳腺癌干细胞微球;流式细胞术检测, CD4++CD24-表型的乳腺癌干细胞高达75.20%。随着时间的延长,MCF-7组和 MCF-7-S组细胞中 ROS水平和细胞凋亡均呈增加的趋势,在12和24 h 达到较大值;在4、8、12和24 h时,MCF-7-S组细胞中 ROS水平均低于 MCF-7组(P<0.05或P<0.01), MCF-7-S组凋亡细胞百分比只在8 h显著高于 MCF-7组细胞(P<0.05);MCF-7+8 Gy组细胞中 ROS水平(4、8、12和24 h)和凋亡细胞百分比(12 h)显著增加(P<0.05),MCF-7-S+8 Gy组凋亡细胞百分比(4、8、12和24 h)显著降低(P<0.05或P<0.01),MCF-7-S+8 Gy组细胞中 ROS水平无明显

作者:方芳;赵雪莲;李丹利;白杨;龚守良;刘扬;王志成

来源:吉林大学学报(医学版) 2014 年 6期

知识库介绍

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作者:
方芳;赵雪莲;李丹利;白杨;龚守良;刘扬;王志成
来源:
吉林大学学报(医学版) 2014 年 6期
标签:
电离辐射 乳腺肿瘤 干细胞 悬浮培养 活性氧 细胞凋亡 细胞周期 ionizing radiation breast neoplasms stem cells suspension culture reactive oxygen species apoptosis cell cycle
目的:研究电离辐射对乳腺癌细胞和乳腺癌干细胞活性氧(ROS)、凋亡和周期分布的影响,探讨乳腺癌干细胞辐射抵抗产生的机制。方法:采用含多种生长因子的无血清培养基悬浮培养人乳腺癌 MCF-7细胞系,分为乳腺癌细胞 MCF-7组、乳腺癌干细胞 MCF-7-S组、MCF-7+8 Gy组和 MCF-7-S+8 Gy组。8 Gy电离辐射后4~24 h,分别采用2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)、AnnexinⅤ-FITC/PI和 PI染色,流式细胞术检测细胞中 ROS水平、凋亡细胞百分比和各细胞周期时相细胞百分比。结果:含多种生长因子无血清悬浮培养7 d后,形成数百个细胞聚集而成的乳腺癌干细胞微球;流式细胞术检测, CD4++CD24-表型的乳腺癌干细胞高达75.20%。随着时间的延长,MCF-7组和 MCF-7-S组细胞中 ROS水平和细胞凋亡均呈增加的趋势,在12和24 h 达到较大值;在4、8、12和24 h时,MCF-7-S组细胞中 ROS水平均低于 MCF-7组(P<0.05或P<0.01), MCF-7-S组凋亡细胞百分比只在8 h显著高于 MCF-7组细胞(P<0.05);MCF-7+8 Gy组细胞中 ROS水平(4、8、12和24 h)和凋亡细胞百分比(12 h)显著增加(P<0.05),MCF-7-S+8 Gy组凋亡细胞百分比(4、8、12和24 h)显著降低(P<0.05或P<0.01),MCF-7-S+8 Gy组细胞中 ROS水平无明显