目的：探讨表皮生长因子受体（EGFR）在调控苯并芘（B[a]P）诱导人支气管上皮 BEAS-2B 细胞沉默信息调节因子1（SIRT1）活化中的作用，阐明 EGFR／SIRT1信号转导通路与肺癌发生发展的关系。方法：MOTIF SearchTM分析软件预测 SIRT1启动子序列上转录 DNA 结合位点。培养 BEAS-2B 细胞，设不加苯并芘的细胞为对照组，苯并芘组细胞暴露于苯并茈（8μmol·L－1）不同时间（6、12、24和48 h），RT-PCR 和蛋白免疫印迹法检测各组细胞中 EGFR mRNA 和蛋白表达水平。将 SIRT1启动子荧光素酶报告载体转染入BEAS-2B细胞中，采用人表皮细胞生长因子（hEGF）和酪氨酸蛋白激酶抑制剂 Genistein 处理细胞24 h，倒置显微镜观察各组 BEAS-2B 细胞形态表现，荧光素酶报告基因技术检测 SIRT1荧光素酶活性。收集相关肺组织临床标本，免疫组织化学法检测肺组织中 EGFR 蛋白表达水平。结果：SIRT1启动子序列上含有表皮细胞生长因子（EGF）、铁氧还蛋白（2Fe-2S）和血管性血友病因子（vWF）3个转录因子的 DNA 结合位点。与对照组比较，苯并芘组细胞中 EGFR mRNA 表达水平升高（P ＜0.05），且在12 h 达到峰值，同时 EGFR 蛋白表达水平均不同程度升高（P ＜0.05）。与对照组比较，hEGF 组和苯并芘组 BEAS-2B 中细胞 SIRT1荧光素
作者：张敏；崔运芹；宋焕芳；吕建祎；徐笑红；高基民
来源：吉林大学学报（医学版） 2016 年 42卷 4期
