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目的:探讨胡桃醌与顺铂联合应用对宫颈癌 HeLa 细胞促凋亡作用的机制,阐明其对相关信号转导通路的作用。方法:选取处于对数生长期的 HeLa 细胞,将其分为对照组、胡桃醌组、顺铂组和胡桃醌+顺铂组(联合用药组)。采用 MTT 法观察不同时间点 HeLa 细胞的增殖抑制率;Hoechst 33258染色法荧光显微镜下观察细胞凋亡形态;Western blotting 法检测各组细胞凋亡相关蛋白 Bcl-2、Bax 和 caspase-3及 PI3K/AKt 通路中AKt 和 pAKt 表达水平。结果:MTT 法,各用药组 HeLa 细胞增殖于24、48和72 h 均可被抑制,与对照组比较,胡桃醌组及顺铂组对细胞的抑制较明显,而联合用药组抑制更加显著;与单用药组比较,联合用药组对细胞的抑制更显著。Hoechst 33258染色,胡桃醌组和顺铂组在处理细胞12 h 后,出现明显的凋亡细胞形态,联合用药组该现象更明显。Western blotting 检测,与对照组比较,12 h 后胡桃醌组和顺铂组 HeLa 细胞中 Bcl-2和pAKt 蛋白表达水平明显降低,而 Bax、Cleave-caspase-3和 AKt 蛋白表达水平明显升高,联合用药组上述变化更加明显。结论:胡桃醌和顺铂联合应用可通过抑制 PI3K/AKt 通路,进而促进 HeLa 细胞凋亡。

作者:陈默然;赵行宇;罗军;朱文赫;李妍;张巍

来源:吉林大学学报(医学版) 2016 年 42卷 5期

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作者:
陈默然;赵行宇;罗军;朱文赫;李妍;张巍
来源:
吉林大学学报(医学版) 2016 年 42卷 5期
标签:
胡桃醌 顺铂 PI3K/AKt 信号转导通路 细胞凋亡 HeLa 细胞 juglone cisplatin PI3K/AKt signal transduction pathways apoptosis HeLa cells
目的:探讨胡桃醌与顺铂联合应用对宫颈癌 HeLa 细胞促凋亡作用的机制,阐明其对相关信号转导通路的作用。方法:选取处于对数生长期的 HeLa 细胞,将其分为对照组、胡桃醌组、顺铂组和胡桃醌+顺铂组(联合用药组)。采用 MTT 法观察不同时间点 HeLa 细胞的增殖抑制率;Hoechst 33258染色法荧光显微镜下观察细胞凋亡形态;Western blotting 法检测各组细胞凋亡相关蛋白 Bcl-2、Bax 和 caspase-3及 PI3K/AKt 通路中AKt 和 pAKt 表达水平。结果:MTT 法,各用药组 HeLa 细胞增殖于24、48和72 h 均可被抑制,与对照组比较,胡桃醌组及顺铂组对细胞的抑制较明显,而联合用药组抑制更加显著;与单用药组比较,联合用药组对细胞的抑制更显著。Hoechst 33258染色,胡桃醌组和顺铂组在处理细胞12 h 后,出现明显的凋亡细胞形态,联合用药组该现象更明显。Western blotting 检测,与对照组比较,12 h 后胡桃醌组和顺铂组 HeLa 细胞中 Bcl-2和pAKt 蛋白表达水平明显降低,而 Bax、Cleave-caspase-3和 AKt 蛋白表达水平明显升高,联合用药组上述变化更加明显。结论:胡桃醌和顺铂联合应用可通过抑制 PI3K/AKt 通路,进而促进 HeLa 细胞凋亡。