目的:研究钙调神经磷酸酶—活化T细胞核因子(CaN-NFAT)信号传导通路参与内皮祖细胞(EPCs)的凋亡过程.方法:采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,贴壁培养获得EPCs.实验分为4组:空白对照组、苯肾上腺素(PE)组、环孢素A(CsA)组、CsA+ PE组.采用TUNEL染色测定EPCs凋亡状况.逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测Bax、Bcl-2、Caspase-3及NFAT4的mRNA的转录水平.免疫荧光染色检测NFAT4亚细胞水平定位.结果:(1) EPCs凋亡检测:与空白对照组及PE组比较,CsA组和CsA+ PE组EPCs凋亡数明显增加[(3.41±0.89)比(4.39±1.92)比(23.68±1.14)比(25.92±2.62),P＜0.05]；(2)与空白对照组和PE组比较,CsA组和CsA+PE组的Bcl-2 mRNA水平、Bcl-2/Bax mRNA比值明显下降(P均＜0.05),Caspase-3 mRNA水平明显升高(P＜0.05).NFAT4 mRNA水平:与空白对照组比较,PE组的明显升高(P＜0.05),CsA组的明显下降(P＜0.05)；与PE组比较,CsA组和CsA+ PE组的NFAT4 mRNA水平均明显下降(P＜0.05).四组之间Bax mRNA水平均无显著差异；(3)与空白对照组比较,PE组NFAT4核转移率明显增加[(25.33±2.08)％比(95±2)％,P＜0.05]；与空白对照组及PE组比较,CsA组和CsA+PE组NFAT4核转移率[(8.00±2.65)％、(7.00±1.73)％]明显下降(P均＜0.05).结论:CaN-NFAT

作者：杨军珂；杨新春；杨龙；胡桃红；谢晓春；赵贵锋；赵明星

来源：心血管康复医学杂志 2013 年 22卷 3期