目的 观察淫羊藿苷(ICA)对S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)诱导的内皮细胞凋亡的影响,并探讨其机制.方法 内皮细胞株EA.hy926由浙江大学提供,将细胞按整群随机抽样法,分成空白对照组、损伤组(GSNO组)、不同浓度(高、中和低浓度)ICA干预组(ICA组)以及蛋白激酶B(AKT)通路的蛋白酶抑制剂LY294002抑制高、中和低浓度ICA组.空白对照组为EA.hy926细胞于96孔板培养,未予任何干预;GSNO组为EA.hy926细胞于96孔板培养48 h后给予1 mmol/L GSNO处理;高、中和低浓度ICA干预组为EA.hy 926细胞于96孔板培养24 h后分别加入10、1和0.1 μmol/L的ICA预保护24 h,再给予1 mmol/L GSNO处理;LY294002抑制高、中和低浓度ICA组为EA.hy 926细胞于96孔板培养24h后分别给予高(10.μmol/L)、中(1μmol/L)和低浓度(0.1 μmol/L) ICA干预的同时加入1 μmol/L LY294002,再作用24 h后给予1 mmol/L GSNO进行干预.噻唑蓝染色(MTT)法测定各组细胞存活率.根据不同试剂盒要求,检测各组细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性、丙二醛(MDA)含量、活性氧(ROS)活性和线粒体膜电位.Western blot法检测各组细胞AKT/磷酸化AKT(p-AKT)、人抑癌蛋白53(P53)、细胞色素C(CYC)、内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)/磷酸化eNOS(p-eNOS)以及procaspase-3/caspase-3蛋白表达水平.结果 (1)各
作者:黄熹;项涛;徐石;陆森;刘辉;张维晨;项鹏辉;许攀峰
来源:中华心血管病杂志 2016 年 44卷 8期