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目的:研究饥饿对Ana-1细胞自噬和凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法:体外培养Ana-1细胞,将细胞分为对照组(饥饿0 h)和饥饿3、6、9、12、24 h组(饥饿组),观察饥饿对细胞自噬与凋亡的影响;将Ana-1细胞分为空白对照组、饥饿组、3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、3-MA联合饥饿组,孵育24 h,采用Western blotting法检测各组细胞中自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值及Beclin-1蛋白表达水平和凋亡相关蛋白Caspase-3蛋白水平,采用倒置显微镜观察饥饿6、12和24 h组细胞形态表现.结果:与对照组比较,饥饿6、12和24 h组Ana-1细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ 比值,饥饿3、6、9、12和24 h组Ana-1细胞中Beclin-1蛋白表达水平均明显升高(P<0.05或P<0.01),饥饿3、6、9、12和24 h组Ana-1细胞中Caspase-3水平明显降低(P<0.01),呈时间依赖性;倒置显微镜下观察,与对照组比较,不同时间饥饿组细胞形态发生改变,细胞皱缩、出现碎片,随着时间的延长,细胞变化更加明显.与饥饿组比较,3-MA联合饥饿组Ana-1细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值和Beclin-1蛋白表达水平及Caspase-3蛋白水平均明显降低(P<0.05或P<0.01).结论:饥饿可诱导Beclin-1依赖的Ana-1细胞自噬并引起细胞凋亡.

作者:杨万霞;苏强;邢爱华;张晓延

来源:吉林大学学报(医学版) 2018 年 44卷 4期

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作者:
杨万霞;苏强;邢爱华;张晓延
来源:
吉林大学学报(医学版) 2018 年 44卷 4期
标签:
Ana-1细胞 饥饿 Beclin-1 细胞自噬 细胞凋亡
目的:研究饥饿对Ana-1细胞自噬和凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法:体外培养Ana-1细胞,将细胞分为对照组(饥饿0 h)和饥饿3、6、9、12、24 h组(饥饿组),观察饥饿对细胞自噬与凋亡的影响;将Ana-1细胞分为空白对照组、饥饿组、3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、3-MA联合饥饿组,孵育24 h,采用Western blotting法检测各组细胞中自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值及Beclin-1蛋白表达水平和凋亡相关蛋白Caspase-3蛋白水平,采用倒置显微镜观察饥饿6、12和24 h组细胞形态表现.结果:与对照组比较,饥饿6、12和24 h组Ana-1细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ 比值,饥饿3、6、9、12和24 h组Ana-1细胞中Beclin-1蛋白表达水平均明显升高(P<0.05或P<0.01),饥饿3、6、9、12和24 h组Ana-1细胞中Caspase-3水平明显降低(P<0.01),呈时间依赖性;倒置显微镜下观察,与对照组比较,不同时间饥饿组细胞形态发生改变,细胞皱缩、出现碎片,随着时间的延长,细胞变化更加明显.与饥饿组比较,3-MA联合饥饿组Ana-1细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值和Beclin-1蛋白表达水平及Caspase-3蛋白水平均明显降低(P<0.05或P<0.01).结论:饥饿可诱导Beclin-1依赖的Ana-1细胞自噬并引起细胞凋亡.