目的:研究结肠癌细胞中miR-30a与Beclin1诱导的自噬之间的关系.方法:用携带miR-30a基因的病毒感染人结肠癌细胞株HCT116细胞,实验设置空白对照组CON(不转染)、阴性对照组NC(转染空载片段)、miR-30a组(转染miR-30a),分别用5μmol/L奥沙利铂注射液药物处理、或不处理,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测HCT116细胞中miR-30a的表达水平,MTT法检测细胞增殖情况,Transwell实验检测HCT116细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡率;将野生型Beclin1或3′UTR突变Beclin1与miR-30a或阴性对照共转染至HCT116细胞,采用双荧光素法检测各组细胞的荧光强度,并结合qRT-PCR及Western blot实验检测miR-30a与Beclin1表达水平之间的关系.结果:奥沙利铂注射液处理前后,与对照组相比,miR-30a组细胞增殖能力和迁移能力均受抑制,凋亡比例增高(P<0.05);双荧光素酶报告系统显示,与空白对照组和NC组相比,野生型Beclin1和miR-30a共转染后双荧光素酶活性降低(P<0.05),而Beclin1突变体和miR-30a共转染不影响双荧光素酶的活性(P>0.05);qRT-PCR及Western blot实验表明miR-30a组细胞中Beclin1基因(mRNA)及蛋白表达水平低于对照组(P<0.05).结论:miR-30a可通过靶向抑制Beclin1的表达,调节结肠癌细胞的自噬过程,进而影响结肠癌的发展.

作者：刘林；孟涛；雷程；杨新辉；王海江

来源：贵州医科大学学报 2020 年 45卷 8期