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目的:探讨慢病毒介导沉默线粒体核糖体蛋白L35 (MRPL35) 基因对人食管癌TE-1细胞生长的影响, 并阐明其机制.方法:选择3种人食管癌TE-1、ECA109和KYSE150细胞, 采用实时定量PCR法检测3种细胞中MRPL35mRNA相对表达水平.食管癌TE-1细胞分为shMRPL35组和shCtrl组, 分别加入沉默靶基因带有嘌呤霉素抗性的si-RNA慢病毒和带有嘌呤霉素抗性的阴性对照si-RNA慢病毒进行感染, 建立稳定沉默MRPL35基因的食管癌细胞系, 实时定量PCR及Western blotting法检测各组细胞中MRPL35基因沉默效率, 采用CCK-8法检测各组细胞生长曲线, AnnexinⅤ-PE/7AAD双染色后流式细胞术检测细胞凋亡率.结果:3种食管癌细胞均表达MRPL35基因, 3种细胞中MRPL35mRNA表达水平比较差异无统计学意义 (P>0.05) .实时定量PCR法和Western blotting法检测, shMRPL35组TE-1细胞中MRPL35mRNA和蛋白表达水平明显低于shCtrl组 (P<0.05) .与shCtrl组比较, shMRPL35组TE-1细胞生长速度明显降低 (P<0.05) , 凋亡率明显升高 (P<0.01) .结论:沉默MRPL35基因可抑制食管癌细胞TE-1增殖, 并通过凋亡途径发挥作用.

作者:王爱馥;张奇;张道明;修雨婷;丁雅明;刘林林

来源:吉林大学学报(医学版) 2019 年 45卷 1期

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作者:
王爱馥;张奇;张道明;修雨婷;丁雅明;刘林林
来源:
吉林大学学报(医学版) 2019 年 45卷 1期
标签:
线粒体核糖体蛋白L35 食管癌TE-1细胞 细胞凋亡 mitochondrial ribosomal protein L35 esophageal cancer TE-1 cells apoptosis
目的:探讨慢病毒介导沉默线粒体核糖体蛋白L35 (MRPL35) 基因对人食管癌TE-1细胞生长的影响, 并阐明其机制.方法:选择3种人食管癌TE-1、ECA109和KYSE150细胞, 采用实时定量PCR法检测3种细胞中MRPL35mRNA相对表达水平.食管癌TE-1细胞分为shMRPL35组和shCtrl组, 分别加入沉默靶基因带有嘌呤霉素抗性的si-RNA慢病毒和带有嘌呤霉素抗性的阴性对照si-RNA慢病毒进行感染, 建立稳定沉默MRPL35基因的食管癌细胞系, 实时定量PCR及Western blotting法检测各组细胞中MRPL35基因沉默效率, 采用CCK-8法检测各组细胞生长曲线, AnnexinⅤ-PE/7AAD双染色后流式细胞术检测细胞凋亡率.结果:3种食管癌细胞均表达MRPL35基因, 3种细胞中MRPL35mRNA表达水平比较差异无统计学意义 (P>0.05) .实时定量PCR法和Western blotting法检测, shMRPL35组TE-1细胞中MRPL35mRNA和蛋白表达水平明显低于shCtrl组 (P<0.05) .与shCtrl组比较, shMRPL35组TE-1细胞生长速度明显降低 (P<0.05) , 凋亡率明显升高 (P<0.01) .结论:沉默MRPL35基因可抑制食管癌细胞TE-1增殖, 并通过凋亡途径发挥作用.