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目的:检测沉默信息调节因子3(Sirt3)对白藜芦醇(Res)诱导的人卵巢癌SKOV3细胞凋亡的影响,探讨其促进凋亡的机制.方法:人卵巢癌SKOV3细胞加入不同浓度(0、2.5、5.0、10.0、20.0、40.0和80.0 mg·L-1)Res培养24 h,MTT法检测细胞存活率.将细胞随机分为对照组、Sirt3抑制剂3-(1H-1,2,3-三唑-4-基)吡啶(3-TYP)组、Res组和3-TYP+Res组,培养24 h后,MTT法检各组细胞增殖抑制率;采用Hoechst 33342进行细胞核染色,激光共聚焦显微镜观察细胞核形态;采用活性氧(ROS)探针检测细胞中ROS水平;Western blotting法检测各组细胞中Sirt3、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase-3)蛋白表达水平.结果:MTT实验,随着Res浓度的增加,细胞存活率明显降低,Res的半数抑制浓度(IC50)为42.73 mg·L-1.与对照组比较,Res组和3-TYP+Res组细胞增殖抑制率明显升高(P<0.05);与Res组比较,3-TYP+Res组细胞增殖抑制率明显升高(P<0.05).与对照组比较,3-TYP+Res组细胞核出现固缩、染色增强、核碎裂增多.与对照组比较,3-TYP组细胞红色荧光无明显变化,Res组和3-TYP+Res组细胞红色荧光明显减少.Western blotting法检测,与对照组比较,3-TYP组细胞中Sirt3蛋白表达水平明显降低(P<0.05),B

作者:李松岩;林冬静;于洋;刘师兵;徐路;孙奇;徐冶

来源:吉林大学学报(医学版) 2020 年 46卷 1期

知识库介绍

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作者:
李松岩;林冬静;于洋;刘师兵;徐路;孙奇;徐冶
来源:
吉林大学学报(医学版) 2020 年 46卷 1期
标签:
3-(1H-1,2,3-三唑-4-基)吡啶 沉默信息调节因子3 白藜芦醇 人卵巢癌SKOV3细胞 细胞凋亡
目的:检测沉默信息调节因子3(Sirt3)对白藜芦醇(Res)诱导的人卵巢癌SKOV3细胞凋亡的影响,探讨其促进凋亡的机制.方法:人卵巢癌SKOV3细胞加入不同浓度(0、2.5、5.0、10.0、20.0、40.0和80.0 mg·L-1)Res培养24 h,MTT法检测细胞存活率.将细胞随机分为对照组、Sirt3抑制剂3-(1H-1,2,3-三唑-4-基)吡啶(3-TYP)组、Res组和3-TYP+Res组,培养24 h后,MTT法检各组细胞增殖抑制率;采用Hoechst 33342进行细胞核染色,激光共聚焦显微镜观察细胞核形态;采用活性氧(ROS)探针检测细胞中ROS水平;Western blotting法检测各组细胞中Sirt3、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase-3)蛋白表达水平.结果:MTT实验,随着Res浓度的增加,细胞存活率明显降低,Res的半数抑制浓度(IC50)为42.73 mg·L-1.与对照组比较,Res组和3-TYP+Res组细胞增殖抑制率明显升高(P<0.05);与Res组比较,3-TYP+Res组细胞增殖抑制率明显升高(P<0.05).与对照组比较,3-TYP+Res组细胞核出现固缩、染色增强、核碎裂增多.与对照组比较,3-TYP组细胞红色荧光无明显变化,Res组和3-TYP+Res组细胞红色荧光明显减少.Western blotting法检测,与对照组比较,3-TYP组细胞中Sirt3蛋白表达水平明显降低(P<0.05),B