目的:探讨牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.g-LPS)对巨噬细胞中铁死亡相关因子表达水平的影响,阐明铁死亡相关因子在牙周炎发病机制中的作用.方法:培养小鼠单核/巨噬细胞系RAW264.7细胞,分为实验组和对照组,实验组加入10 mg·L-1 P.g-LPS分别处理6、12和24 h,对照组不做任何处理.采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组RAW264.7细胞中长链酯酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和转铁蛋白受体1(TfR1)mRNA表达水平,2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针法检测2组RAW264.7细胞中活性氧(ROS)水平,硫代巴比妥酸(TBA)法检测2组RAW264.7细胞中丙二醛(MDA)水平,亚铁离子荧光探针(FeRhonox-1)法检测2组RAW264.7细胞中亚铁离子(Fe2+)水平,Western blotting法检测2组RAW264.7细胞中ACSL4、GPX4和TfR1蛋白表达水平.结果:与对照组比较,处理6、12和24 h后,实验组RAW264.7细胞中GPX4 mRNA表达水平降低(P<0.05),处理12和24 h后ACSL4和TfR1 mRNA表达水平升高(P<0.05);处理12和24 h后,实验组RAW264.7细胞中ACSL4和TfR1蛋白表达水平升高(P<0.05),GPX4蛋白表达水平降低(P<0.05).与对照组比较,实验组RAW264.7细胞中ROS、MDA和Fe2+水平升高(P<0.05),且随时间增加呈上升趋势.结论:P.g-LPS诱导下RAW264.7细胞中铁死
作者:杜雪纯;李保胜;乔树伟;欧燕珍;李珍;孟维艳
来源:吉林大学学报(医学版) 2022 年 48卷 5期