目的:探讨巨噬细胞外泌体长链非编码RNA(lncRNA)肝癌高表达转录本(HULC)在肝细胞癌(HCC)转移中的作用,并阐明其作用机制.方法:分离小鼠骨髓单核细胞,采用佛波酯诱导分化为骨髓源巨噬细胞(BMDM),并用白细胞介素4(IL-4)将BMDM诱导分化为M2巨噬细胞,即肿瘤相关巨噬细胞(TAM).差速离心法收集M2巨噬细胞外泌体(TAM-exos).在TAM中分别转染lncRNA HULC-siRNA或NC质粒后提取各组TAM分泌的外泌体(lncRNA HULC-siRNA-exos或NC-exos).将HepG2细胞按照实验目的分为对照组和TAM-exos组;NC-exos组和lncRNA HULC-siRNA-exos组;lncRNA HULC-siRNA-exos组和lncRNA HULC-siRNA-exos+SKL2001组.给予相应处理后,Transwell小室实验检测HepG2 细胞的迁移和侵袭细胞数,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测 HepG2 细胞中 lncRNA HULC 表达水平,Western blotting法检测 HepG2 细胞中Wnt3A、β-连环蛋白(β-catenin)、c-Myc和Cyclin D1蛋白表达水平.构建裸鼠原位肝癌移植模型,分为对照组、NC-exos组、TAM-exos组和lncRNA HULC-siRNA-exos组,检测M2 巨噬细胞外泌体lncRNA HULC作用后裸鼠原位移植瘤肺转移灶数.结果:TAM-exos符合外泌体的形态和生物学特征.与对照组比较,TAM-exos 组 HepG2 细胞的迁移和侵袭细胞数及细胞中 lncRNA HULC、Wn

作者：董勇；徐菱遥；华静；梁晗；刘东亚；赵俊波；孙正路；程序；魏书堂

来源：吉林大学学报（医学版） 2023 年 49卷 5期