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目的:观察反转录病毒介导的双自杀基因对Raji淋巴瘤细胞的杀伤增强作用,探讨淋巴瘤的基因治疗方法.方法:通过脂质体将含有双自杀基因的反转录病毒载体pWZLneoCDglytk导入病毒包装细胞PA317,经G418筛选后大量培养产病毒的阳性克隆PA31 7/CD)+tk细胞株,收集病毒上清,浓缩后转染Raji淋巴瘤细胞,再次经G418筛选,获得稳定表达双自杀基因的Raji/CD+tk细胞株.用RT-PCR检测双自杀基因的表达.给予前体药物5-氟胞嘧啶(5-flourocytosine,5-FC)和/或无环鸟苷(Ganciciovir,GCV)后,MTT法测定细胞的存活率及CDglytk双自杀基因对Raji细胞的杀伤作用.结果:双自杀基因在Raji细胞中可稳定表达,联合使用5-FC和GCV时Raji细胞的存活率(13.83

作者:姜义荣;刘春生;马道新;陈学良

来源:白血病·淋巴瘤 2003 年 12卷 3期

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作者:
姜义荣;刘春生;马道新;陈学良
来源:
白血病·淋巴瘤 2003 年 12卷 3期
标签:
反转录病毒 自杀基因 细胞 淋巴瘤 基因治疗
目的:观察反转录病毒介导的双自杀基因对Raji淋巴瘤细胞的杀伤增强作用,探讨淋巴瘤的基因治疗方法.方法:通过脂质体将含有双自杀基因的反转录病毒载体pWZLneoCDglytk导入病毒包装细胞PA317,经G418筛选后大量培养产病毒的阳性克隆PA31 7/CD)+tk细胞株,收集病毒上清,浓缩后转染Raji淋巴瘤细胞,再次经G418筛选,获得稳定表达双自杀基因的Raji/CD+tk细胞株.用RT-PCR检测双自杀基因的表达.给予前体药物5-氟胞嘧啶(5-flourocytosine,5-FC)和/或无环鸟苷(Ganciciovir,GCV)后,MTT法测定细胞的存活率及CDglytk双自杀基因对Raji细胞的杀伤作用.结果:双自杀基因在Raji细胞中可稳定表达,联合使用5-FC和GCV时Raji细胞的存活率(13.83