目的:观察逆转录病毒介导的胞嘧啶脱氨酶(E.Coli-cytosine deaminase,CD)基因、单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpes simplex virus-thymidine kinase,HSV-tk)基因转染肝门部胆管癌的作用.方法:在脂质体lipofectamine的介导下将含有双自杀基因的逆转录病毒载体PWZLneoCDglytk导入包装细胞PA317,收集其病毒上清,转染FRH细胞,用RT-PCR检测双自杀基因的表达.给予前体药物5-氟胞嘧啶(5-flourocytosine,5-Fc)和(或)无环鸟苷(ganciciovir,GCV)后,用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法测定转基因组及未转基因组FRH细胞存活率.在0.8 cm裸鼠肝门部胆管癌模型转染入双自杀基因后,给予5-Fc500 mg/kg体重,GCVl00 mg/kg体重,1次/d,共10 d,观察肿瘤生长情况.结果:双自杀基因在FRH细胞中可稳定表达,联合使用5-Fc和GCV对靶细胞增殖的杀伤作用及旁杀伤效应高于单独使用5-Fc或GCV.在裸鼠实验性肝门部胆管癌,实验组肿瘤的生长明显受到抑制(P＜0.05);双自杀基因与单自杀基因的作用有显著差异(P＜0.05).结论:逆转录病毒介导自杀基因可有效地杀死肝门部胆管癌细胞,明显抑制裸鼠肝门部胆管癌生长,双自杀基因共表达较单一自杀基因有更强的抗肿瘤作用.
作者：李志伟；王占民；吴晓鹏；刘军；马道新；刘春生；姜义蓉
来源：山东大学学报（医学版） 2005 年 43卷 5期
