目的 观察肺腺癌A549细胞经Tet-on系统诱导表达esp1基因后其染色体数目的改变.方法 利用PTet-on基因表达调控系统,先后将调控质粒Ptet-on和反应质粒PTK-Hyg与PTRE-EGFP-esp1以合适的比例用FuGENE 6 脂质体共转染入A549细胞,经G418和潮霉素筛选成活并带有绿色荧光的细胞为转染成功细胞,挑选8个单细胞克隆并扩增培养,加入强力霉素诱导esp1表达.用RT-PCR检测不同浓度强力霉素诱导以及强力霉素诱导不同时间的esp1的表达量,并采用传统秋水仙素方法以及流式细胞技术检测诱导不同时间段A549/Ptet-on/TK-Hyg/PTRE-EGFP-esp1细胞克隆染色体数目的改变.结果 100～200ng/ml浓度范围的强力霉素诱导esp1表达量最高,诱导1h即可有esp1基因的表达,至48h表达量到达高峰之后逐步减少.在诱导24h后逐步出现染色体数目减少.结论 上调esp1基因对肿瘤细胞异常染色体有一定的抑制作用,对肿瘤治疗有潜在的应用价值.
作者：刘丽莎；刘昕；程英
来源：重庆医学 2006 年 35卷 20期
