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目的 研究胸腺素β4基因对人肾小管上皮细胞株(HKC)上皮-肌成纤维细胞转分化(EMT)的影响.方法 采用 RT-PCR和 T-A克隆技术,从SW480细胞中扩增胸腺素β4基因全长 cDNA,克隆到T载体中,再亚克隆到 pIRES2-EGFP质粒载体,得到表达胸腺素β4基因的真核表达载体和阴性对照载体,转染HKC,得到胸腺素β4表达增强的HKC-Tβ4和胸腺素β4表达未受影响的HKC-EGFP.分别采用RT-PCR和Western blot检测HKC、HKC-Tβ4和HKC-EGFP 3组细胞胸腺素β4、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏素表达.结果 与HKC组及HKC-EGFP组相比,HKC-Tβ4组胸腺素β4和α-SMA表达显著增高,E-钙黏素表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.01).结论 胸腺素β4基因转染能诱导HKC发生EMT,提示胸腺素β4是诱导EMT的重要分子,可能成为肾纤维化治疗的靶目标.

作者:张璟;郑颖;敖绪军

来源:重庆医学 2009 年 38卷 17期

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作者:
张璟;郑颖;敖绪军
来源:
重庆医学 2009 年 38卷 17期
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胸腺素β4 人肾小管上皮细胞 肌成纤维细胞 真核表达载体 转分化
目的 研究胸腺素β4基因对人肾小管上皮细胞株(HKC)上皮-肌成纤维细胞转分化(EMT)的影响.方法 采用 RT-PCR和 T-A克隆技术,从SW480细胞中扩增胸腺素β4基因全长 cDNA,克隆到T载体中,再亚克隆到 pIRES2-EGFP质粒载体,得到表达胸腺素β4基因的真核表达载体和阴性对照载体,转染HKC,得到胸腺素β4表达增强的HKC-Tβ4和胸腺素β4表达未受影响的HKC-EGFP.分别采用RT-PCR和Western blot检测HKC、HKC-Tβ4和HKC-EGFP 3组细胞胸腺素β4、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏素表达.结果 与HKC组及HKC-EGFP组相比,HKC-Tβ4组胸腺素β4和α-SMA表达显著增高,E-钙黏素表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.01).结论 胸腺素β4基因转染能诱导HKC发生EMT,提示胸腺素β4是诱导EMT的重要分子,可能成为肾纤维化治疗的靶目标.