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目的 构建单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)特异性小分子干扰RNA(siRNA)的真核表达载体,研究siRNA对人肾小管上皮细胞(HKC)MCP-1基因的沉默作用.方法 采用基因克隆技术,将合成的MCP-1特异性siRNA插入真核表达载体Prnat-U6/Neo中,构建MCP-1 siRNA真核表达栽体.将Prnat-MCP-1质粒以脂质体法转染HKC,24 h后应用实时定量RT-PCR技术检测FIKC内MCP-1mRNA水平的表达情况.结果 成功构建MCP-1 siRNA真核表达载体,转染MCP-1 siRNA的HKC,24 h后HKC内MCP-1mRNA水平表达明显降低,抑制效率达90

作者:刘娜;严海东;牵雪竹

来源:同济大学学报(医学版) 2007 年 28卷 2期

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刘娜;严海东;牵雪竹
来源:
同济大学学报(医学版) 2007 年 28卷 2期
标签:
单核细胞趋化蛋白1 小分子干扰RNA 真核表达载体 肾间质纤维化 人肾小管上皮细胞
目的 构建单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)特异性小分子干扰RNA(siRNA)的真核表达载体,研究siRNA对人肾小管上皮细胞(HKC)MCP-1基因的沉默作用.方法 采用基因克隆技术,将合成的MCP-1特异性siRNA插入真核表达载体Prnat-U6/Neo中,构建MCP-1 siRNA真核表达栽体.将Prnat-MCP-1质粒以脂质体法转染HKC,24 h后应用实时定量RT-PCR技术检测FIKC内MCP-1mRNA水平的表达情况.结果 成功构建MCP-1 siRNA真核表达载体,转染MCP-1 siRNA的HKC,24 h后HKC内MCP-1mRNA水平表达明显降低,抑制效率达90