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目的 探讨siRNA沉默KLK6基因表达对乳腺癌细胞生长的抑制作用及其机制,为乳腺癌的基因诊断和治疗提供理论依据.方法 针对KLK6 mRNA 序列设计合成siRNA,构建2个重组质粒PGCsilencerTMH1/GFP/Neo/KLK6和PGCsilencerTMH1/GFP/Neo/Non;将重组质粒导入乳腺癌MCF-7细胞株,G418筛选获得稳定转染的细胞株;实验分为脂质体对照、阴性质粒转染对照及KLK6 siRNA 重组质粒转染组,实时荧光定量PCR 法检测KLK6 mRNA 的表达的变化,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测量细胞生长情况.结果 测序证实表达载体构建成功,在稳定转染重组质粒PGCsilencerTMH1/GFP/Neo/KLK6的乳腺癌MCF-7细胞株中,KLK6 mRNA抑制率(76

作者:季丙元;关晶

来源:重庆医学 2011 年 40卷 14期

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作者:
季丙元;关晶
来源:
重庆医学 2011 年 40卷 14期
标签:
RNA,小分子干扰 乳腺肿瘤 kallikrein6
目的 探讨siRNA沉默KLK6基因表达对乳腺癌细胞生长的抑制作用及其机制,为乳腺癌的基因诊断和治疗提供理论依据.方法 针对KLK6 mRNA 序列设计合成siRNA,构建2个重组质粒PGCsilencerTMH1/GFP/Neo/KLK6和PGCsilencerTMH1/GFP/Neo/Non;将重组质粒导入乳腺癌MCF-7细胞株,G418筛选获得稳定转染的细胞株;实验分为脂质体对照、阴性质粒转染对照及KLK6 siRNA 重组质粒转染组,实时荧光定量PCR 法检测KLK6 mRNA 的表达的变化,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测量细胞生长情况.结果 测序证实表达载体构建成功,在稳定转染重组质粒PGCsilencerTMH1/GFP/Neo/KLK6的乳腺癌MCF-7细胞株中,KLK6 mRNA抑制率(76