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目的 观察5-氮-2 '-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人膀胱癌T24细胞增殖、凋亡的影响及其对凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)、结肠腺瘤性息肉病(APC)基因甲基化表达状况的影响.方法 应用不同浓度的5-Aza-CdR处理人膀胱癌T24细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞生长抑制率;流式细胞术(FCM)检测细胞周期和凋亡的变化情况;以甲基化特异性PCR方法(MSP法)检测膀胱癌T24细胞株中Apaf-1及APC基因的甲基化状态.结果 膀胱癌T24细胞中Apaf-1、APC基因分别呈半甲基化及高甲基化,5-Aza-CdR作用后T24细胞中Apaf-1及APC基因启动子区域均呈去甲基化状态;T24细胞的生长受到明显抑制,0.50、1.00、2.50、5.00μmol/L 5-Aza-CdR作用T24细胞72 h后,细胞生长抑制率分别为0.50%、5.40%、20.40%、23.00%,组间比较差异有统计学意义(P<0.05),呈剂量和时间依赖关系.72 h后G0/G1期的比例增加,S期比例明显减少,细胞凋亡率明显增加,5.00 μmol/L 5-Aza-CdR组凋亡率为(40.35士3.63)%,对照组为(8.17±1.52)%,组间比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 5-Aza-CdR能逆转膀胱癌T.细胞中的Apaf-1及APC基因甲基化,恢复该基因的表达,诱导膀胱癌T24细胞凋亡.

作者:王文卫;潘俊;陈凌武;林焕懿;曾令友

来源:重庆医学 2013 年 42卷 13期

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作者:
王文卫;潘俊;陈凌武;林焕懿;曾令友
来源:
重庆医学 2013 年 42卷 13期
标签:
膀胱肿瘤 DNA甲基化 癌基因 5-氮-2'-脱氧胞苷
目的 观察5-氮-2 '-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人膀胱癌T24细胞增殖、凋亡的影响及其对凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)、结肠腺瘤性息肉病(APC)基因甲基化表达状况的影响.方法 应用不同浓度的5-Aza-CdR处理人膀胱癌T24细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞生长抑制率;流式细胞术(FCM)检测细胞周期和凋亡的变化情况;以甲基化特异性PCR方法(MSP法)检测膀胱癌T24细胞株中Apaf-1及APC基因的甲基化状态.结果 膀胱癌T24细胞中Apaf-1、APC基因分别呈半甲基化及高甲基化,5-Aza-CdR作用后T24细胞中Apaf-1及APC基因启动子区域均呈去甲基化状态;T24细胞的生长受到明显抑制,0.50、1.00、2.50、5.00μmol/L 5-Aza-CdR作用T24细胞72 h后,细胞生长抑制率分别为0.50%、5.40%、20.40%、23.00%,组间比较差异有统计学意义(P<0.05),呈剂量和时间依赖关系.72 h后G0/G1期的比例增加,S期比例明显减少,细胞凋亡率明显增加,5.00 μmol/L 5-Aza-CdR组凋亡率为(40.35士3.63)%,对照组为(8.17±1.52)%,组间比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 5-Aza-CdR能逆转膀胱癌T.细胞中的Apaf-1及APC基因甲基化,恢复该基因的表达,诱导膀胱癌T24细胞凋亡.