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目的:研究T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域分子-3(Tim-3)在人肝癌细胞系中的表达及其对肝癌细胞肿瘤生物学行为的影响。方法采用荧光实时定量PCR(FQ-PCR)和蛋白免疫印迹方法检测人正常肝细胞株 L02和肝细胞肝癌(HCC)细胞株 HepG2、SMMC7721中Tim-3在mRNA和蛋白质水平的表达。运用 siRNA转染技术沉默 Tim-3基因在 HepG2细胞株中的表达,免疫印迹筛选干扰效率最高的基因片段。MTT和细胞划痕实验检测沉默 Tim-3基因后对细胞增殖、迁移能力的影响。结果 FQ-PCR及免疫印迹方法检测显示,人 HCC细胞株 HepG2、SMMC7721中 Tim-3 mRNA和蛋白的表达均较正常肝细胞株 L02明显增高(P<0.05)。转染Tim-3 siRNA后,肝癌细胞株 HepG2中 Tim-3蛋白水平表达明显降低。与对照组比较,细胞的增殖、迁移能力显著下降。结论 Tim-3 mRNA及蛋白水平在肝癌细胞株中表达明显升高,促进细胞的增殖、迁移。

作者:魏东;匡怡;刘孟刚;周波;陈平

来源:重庆医学 2014 年 16期

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作者:
魏东;匡怡;刘孟刚;周波;陈平
来源:
重庆医学 2014 年 16期
标签:
癌,肝细胞 T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域分子3 细胞增殖 carcinoma,hepatocellular T-cell-immunoglobulin-mucin-3 cell-proliferation
目的:研究T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域分子-3(Tim-3)在人肝癌细胞系中的表达及其对肝癌细胞肿瘤生物学行为的影响。方法采用荧光实时定量PCR(FQ-PCR)和蛋白免疫印迹方法检测人正常肝细胞株 L02和肝细胞肝癌(HCC)细胞株 HepG2、SMMC7721中Tim-3在mRNA和蛋白质水平的表达。运用 siRNA转染技术沉默 Tim-3基因在 HepG2细胞株中的表达,免疫印迹筛选干扰效率最高的基因片段。MTT和细胞划痕实验检测沉默 Tim-3基因后对细胞增殖、迁移能力的影响。结果 FQ-PCR及免疫印迹方法检测显示,人 HCC细胞株 HepG2、SMMC7721中 Tim-3 mRNA和蛋白的表达均较正常肝细胞株 L02明显增高(P<0.05)。转染Tim-3 siRNA后,肝癌细胞株 HepG2中 Tim-3蛋白水平表达明显降低。与对照组比较,细胞的增殖、迁移能力显著下降。结论 Tim-3 mRNA及蛋白水平在肝癌细胞株中表达明显升高,促进细胞的增殖、迁移。