目的：研究少汗型外胚层发育不良症 EDA‐A1基因突变体对人脐静脉内皮细胞（ECV ）周期和增殖活性的影响。方法构建 EDA‐A1基因编码序列（CDS）突变体和野生型的真核表达载体 pcDNA3．1（‐）‐EDA‐A1‐M /W ，转染人脐静脉内皮细胞，逆转录 PCR（RT‐PCR）扩增 EDA‐A1基因，蛋白免疫印迹法（Western blot）法检测 EDA‐A1蛋白表达，M TT 法、流式细胞术检测EDA‐A1基因突变体对 ECV 细胞增殖和细胞周期的影响。结果 RT‐PCR 、Western blot 结果显示，野生型组和突变体组 ECV细胞表达 EDA‐A1基因及其蛋白，而空质粒转染组[pcDNA3．1（‐）]和空白对照组细胞无表达。与对照组（空质粒租）相比，突变体组 ECV 细胞增殖活性下降，生长抑制率为45．70％（P＜0．01），野生型细胞增殖活性无明显改变（P＞0．05）。突变体组中有更多细胞进入 G0/G1期、S 期；野生型组 S 期细胞增多，G2/M 期细胞明显减少（P＜0．05）。结论突变体和野生型 EDA‐A1基因对 ECV 细胞增殖和细胞周期有不同的生物学功能。
作者：雷科；王伦昌；李龙江；车团结；何祥一
来源：重庆医学 2014 年 31期
