目的：探讨内皮型一氧化氮合酶（eNOS）在促红细胞生成素（EPO）调节慢性缺氧环境中心肌细胞线粒体生物合成中的作用及其机制。方法采用H9c2心肌细胞，将其于缺氧环境下培养7 d （94％ N2，5％ O2），建立心肌细胞慢性缺氧模型。将心肌细胞根据不同处理分为缺氧对照组（HC），20 U／mL重组人 EPO（rhEPO）处理缺氧组（HE）和20 U／mL rhEPO＋ eNOS shRNA干扰处理缺氧组（HR）。以荧光探针检测线粒体数量变化；RT‐PCR检测线粒体DNA相对表达量；Western blot 检测eNOS总蛋白表达及磷酸化水平（p‐eNOS）变化。结果 rhEPO显著增强eNOS磷酸化水平，增加线粒体数量及其DNA相对拷贝数（P＜0．05）；而同时采用shRNA干扰eNOS后，HR组eNOS总蛋白表达及磷酸化水平较HE组降低（P＜0．05），同时线粒体数量及其DNA相对拷贝数较 HE组减少（P＜0．05）。结论 eNOS的磷酸化激活是EPO增强慢性缺氧心肌细胞线粒体生物合成的重要信号转导机制。
作者：秦川；陈林；肖颖彬
来源：重庆医学 2015 年 16期
