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目的:探讨miR‐21对过氧化氢(H2 O2)诱导的 H9c2心肌细胞损伤的影响。方法体外培养H9c2心肌细胞,实验分为4组,空白对照组、阴性对照组(miR‐21 mimics NC)、H2O2组、H2O2+miR‐21 mimics组;采用MTT法及AnnexinV‐PI流式双染法检测各组细胞活力和凋亡情况;DCFH‐DA探针负载方法检测各组细胞内活性氧(ROS)水平;分光光度法检测各组丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测程序性细胞死亡因子4(PDCD4)、Bax、Bcl‐2及人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因蛋白(PTEN)/蛋白激酶(AKT)信号通路激活情况。结果与空白对照组及阴性对照组比较,H2 O2组中细胞活力下降(P<0.01),ROS荧光强度及MDA水平增加(P<0.01),SOD水平下降(P<0.01),细胞凋亡率上升(P<0.01),Bcl‐2表达及AKT磷酸水平下调(P<0.01),Bax、PDCD4及PTEN表达上调(P<0.01)。与H2 O2组比较, H2O2+miR‐21 mimics组中细胞活力提高(P<0.01),ROS荧光强度及MDA水平降低(P<0.01),SOD水平提高(P<0.01),细胞凋亡率降低(P<0.01),Bcl‐2表达及AKT磷酸水平上调(P<0.01),Bax、PDCD4及PTEN表达下调(P<0.01)。结论 miR‐21过表达能显

作者:张亚琴

来源:重庆医学 2016 年 45卷 16期

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作者:
张亚琴
来源:
重庆医学 2016 年 45卷 16期
标签:
miR-21 H9c2心肌细胞 氧化应激 凋亡
目的:探讨miR‐21对过氧化氢(H2 O2)诱导的 H9c2心肌细胞损伤的影响。方法体外培养H9c2心肌细胞,实验分为4组,空白对照组、阴性对照组(miR‐21 mimics NC)、H2O2组、H2O2+miR‐21 mimics组;采用MTT法及AnnexinV‐PI流式双染法检测各组细胞活力和凋亡情况;DCFH‐DA探针负载方法检测各组细胞内活性氧(ROS)水平;分光光度法检测各组丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测程序性细胞死亡因子4(PDCD4)、Bax、Bcl‐2及人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因蛋白(PTEN)/蛋白激酶(AKT)信号通路激活情况。结果与空白对照组及阴性对照组比较,H2 O2组中细胞活力下降(P<0.01),ROS荧光强度及MDA水平增加(P<0.01),SOD水平下降(P<0.01),细胞凋亡率上升(P<0.01),Bcl‐2表达及AKT磷酸水平下调(P<0.01),Bax、PDCD4及PTEN表达上调(P<0.01)。与H2 O2组比较, H2O2+miR‐21 mimics组中细胞活力提高(P<0.01),ROS荧光强度及MDA水平降低(P<0.01),SOD水平提高(P<0.01),细胞凋亡率降低(P<0.01),Bcl‐2表达及AKT磷酸水平上调(P<0.01),Bax、PDCD4及PTEN表达下调(P<0.01)。结论 miR‐21过表达能显