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目的 将热休克人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)提取物与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共培养,以期提高早期CIK的增殖、分泌细胞因子及体外杀伤等能力,为得到高质量CIK提供研究基础.方法 (1)从外周血单个核细胞中常规诱导培养CIK;(2)热休克处理hAMSCs(42℃,1 h),48 h后收集上清液及胞内物质,将提取物与第10天CIK(370 μg:2×106个)共培养;(3)计数第12、14、17天CIK细胞数,绘制生长曲线;(4)酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞因子白细胞介素(IL)-2、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)的分泌量;(5)MTT法检测CIK对A549的体外杀伤活性.结果 (1)加入hAMSCs提取物的实验组增殖速度明显高于对照组,第12、14、17天CIK细胞数分别为[(5.26±0.01)×105/mL vs.(5.60±0.00)×105/mL)]、[(6.26±0.23)×105/mL vs.(9.37±0.15)×105/mL]、[(8.10±0.75)×105/mL vs.(11.00±1.67)×105/mL],差异有统计学意义(P<0.05);(2) ELISA结果表明,hAMSCs提取物对早期CIK细胞分泌细胞因子有一定促进能力,两组第14天IL-2、TNF-α、IFN-γ量(pg/mL)分别为(13.49±0.78 vs.15.49±3.47)、(53.52±5.52 vs.33.83±15.61)、(60.68±19.39vs.50.24±18.89),差异无统计学意义(P>0.05);(3) MTT结果:对照组与实验组IC50分别为(38.60±18

作者:李培义;李宁;王雪;张川骎;李菲;罗清

来源:重庆医学 2016 年 45卷 29期

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作者:
李培义;李宁;王雪;张川骎;李菲;罗清
来源:
重庆医学 2016 年 45卷 29期
标签:
杀伤细胞 人羊膜间充质干细胞 A549肺腺癌细胞 热休克 cytokine induced killer cells human amniotic mesenchymal stem cells A549 lung adenocarcinoma cells heat shock
目的 将热休克人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)提取物与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共培养,以期提高早期CIK的增殖、分泌细胞因子及体外杀伤等能力,为得到高质量CIK提供研究基础.方法 (1)从外周血单个核细胞中常规诱导培养CIK;(2)热休克处理hAMSCs(42℃,1 h),48 h后收集上清液及胞内物质,将提取物与第10天CIK(370 μg:2×106个)共培养;(3)计数第12、14、17天CIK细胞数,绘制生长曲线;(4)酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞因子白细胞介素(IL)-2、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)的分泌量;(5)MTT法检测CIK对A549的体外杀伤活性.结果 (1)加入hAMSCs提取物的实验组增殖速度明显高于对照组,第12、14、17天CIK细胞数分别为[(5.26±0.01)×105/mL vs.(5.60±0.00)×105/mL)]、[(6.26±0.23)×105/mL vs.(9.37±0.15)×105/mL]、[(8.10±0.75)×105/mL vs.(11.00±1.67)×105/mL],差异有统计学意义(P<0.05);(2) ELISA结果表明,hAMSCs提取物对早期CIK细胞分泌细胞因子有一定促进能力,两组第14天IL-2、TNF-α、IFN-γ量(pg/mL)分别为(13.49±0.78 vs.15.49±3.47)、(53.52±5.52 vs.33.83±15.61)、(60.68±19.39vs.50.24±18.89),差异无统计学意义(P>0.05);(3) MTT结果:对照组与实验组IC50分别为(38.60±18