目的 探讨miR-146a对血小板免疫炎症功能的影响.方法 体外培养双分化潜能的K562细胞,佛波酯诱导其向巨核细胞系分化,分别导入miR-146a模拟物和阻遏物.ELISA检测白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达水平;Western blot及RT-PCR检测转染细胞后Toll样受体4(TLR4)、核因子(NF)-κB蛋白和mRNA的表达水平;通过荧光素酶报告基因法验证IL-1受体相关激酶1(IRAK1)是否含有miR-146a的靶位点,观察miR-146a对靶基因IRAK1的影响.结果 过表达miR-146a后,细胞上清中IL-6、TNF-α水平降低,TLR4蛋白表达明显升高,NF-κB mRNA和蛋白表达明显降低.抑制miR-146a后,细胞上清中IL-6、TNF-α水平升高,TLR4蛋白表达明显降低,NF-κB mRNA和蛋白表达明显升高.双荧光素酶报告实验证实Pmir-Report-WT-IRAK1和miR-146a mimic共转染组的荧光素酶报告基因活性明显受到抑制,miR-146a过表达可抑制IRAK1蛋白表达,而对IRAK1 mRNA表达无影响.结论 miR-146a可能通过IRAK1作用于TLR4/NF-κB信号通路,从而调控血小板免疫炎症.
作者：徐吉淋；王路乔；梁倩；杨人强
来源：重庆医学 2019 年 48卷 13期
