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目的:观察肌细胞特异性表达hFⅨ重组逆转录病毒载体(RV-hFⅨ)体外转染成肌细胞后的表达效果.方法:采用产病毒细胞株pdLⅨm1β A200Me1/PA317和pdLⅨm2βA200Me1/PA317培养上清,体外转染原代人胎、联合免疫缺陷(SCID)小鼠及C57鼠成肌细胞,ELISA法检测细胞培养上清中hFⅨ分泌水平.结果:不同来源成肌细胞经两种载体转染后均有hFⅨ蛋白分泌,其中人胎成肌细胞表达优于鼠源成肌细胞,106个细胞,24 h表达最高值为(792±49) ng.成肌细胞分化后hFⅨ分泌水平高于分化前.结论:RV-hFⅨ体外转染成肌细胞后可表达较高量的目的蛋白.

作者:王雪松;王健民;孟沛霖

来源:第二军医大学学报 2000 年 21卷 1期

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作者:
王雪松;王健民;孟沛霖
来源:
第二军医大学学报 2000 年 21卷 1期
标签:
血友病 基因治疗 逆转录病毒载体 成肌细胞
目的:观察肌细胞特异性表达hFⅨ重组逆转录病毒载体(RV-hFⅨ)体外转染成肌细胞后的表达效果.方法:采用产病毒细胞株pdLⅨm1β A200Me1/PA317和pdLⅨm2βA200Me1/PA317培养上清,体外转染原代人胎、联合免疫缺陷(SCID)小鼠及C57鼠成肌细胞,ELISA法检测细胞培养上清中hFⅨ分泌水平.结果:不同来源成肌细胞经两种载体转染后均有hFⅨ蛋白分泌,其中人胎成肌细胞表达优于鼠源成肌细胞,106个细胞,24 h表达最高值为(792±49) ng.成肌细胞分化后hFⅨ分泌水平高于分化前.结论:RV-hFⅨ体外转染成肌细胞后可表达较高量的目的蛋白.