目的 克隆大鼠脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factors,BDNF)基因并构建含BDNF基因片段的真核表达载体pLXSN-BDNF,用于视神经损伤修复的基因治疗.方法 利用RT-PCR的方法从大鼠海马组织的总RNA中扩增BDNF基因片段,序列两端分别引入限制性内切酶识别位点EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ,并将其定向克隆入pMD18-T Smple载体,测序正确后亚克隆入逆转录病毒载体pLXSN.结果 经过PCR、酶切和测序鉴定,所克隆的BDNF基因序列正确,克隆的BDNF基因已经正确插入到逆转录病毒载体pLXSN中.结论 成功克隆了BDNF基因并且构建了真核表达载体pLXSN-BDNF,为进一步研究基因治疗视神经损伤疾病奠定基础.
作者：邵正波；原慧萍；周欣荣；李鸿翼；曲巍；杨滨滨
来源：眼科新进展 2006 年 26卷 11期
