目的:研究热休克蛋白70D(heat shock protein 70D, HSP70D)的基因克隆、重组表达及纯化.方法:采用RT-PCR方法从HeLa细胞中克隆HSP70D全长编码区cDNA序列,构建原核表达载体pET24a(+)-HSP70D,经过DNA序列测定证实其序列正确.完成基因工程人HSP70D的高表达工程菌的筛选后,对其发酵、蛋白表达条件及重组蛋白的纯化条件进行优化.结果:重组表达载体经序列测定及酶切鉴定与理论推测结果相符,高表达工程菌经优化表达条件后rhHSP70D的表达量可占菌体总蛋白的20
作者:常卫红
来源:第二军医大学学报 2002 年 23卷 10期