目的:研究HGV和HCV的复制和表达.方法:利用HGV全长cDNA克隆(HGVqz) 及HCV 1a/1b嵌合体cDNA克隆分别构建表达质粒p3.1HGV和p3.1HCV并转染张氏肝细胞,以HGVqz克隆建立HGV转基因小鼠.分别应用RT-PCR、免疫组化及Western印迹分析病毒正、负链RNA,蛋白表达和剪切.结果:在转染p3.1HCV的张氏肝细胞及HGV转基因小鼠某些组织中可检出相应病毒的负链RNA,但在转染p3.1HGV的张氏肝细胞中未能检出HGV负链RNA.Western印迹在转染p3.1HCV的张氏肝细胞中检测到针对HCV NS3蛋白、相对分子质量约70 000的特异性条带,在HGV转基因小鼠某些组织中检测到2条特异性条带,相对分子质量约42 000和100 000,分别相当于HGV E2蛋白及其剪切中间体.然而,在转染p3.1HGV的张氏肝细胞中检测到针对HGV E2蛋白的特异性条带,其相对分子质量约为310 000,相当于HGV整个前体蛋白.结论:HGV的表达与复制在体内、外存在差异.细胞内某些特异性因子在病毒前体蛋白剪切中起重要作用,HGV 和 HCV前体蛋白剪切所需宿主因子可能存在差异,故两种病毒体外培养时的嗜性细胞株并不完全一致.
作者：王宏卫；潘欣；戚中田
来源：第二军医大学学报 2004 年 25卷 4期
