目的:构建重组人缺氧诱导因子-1α腺相关病毒载体(rAAV-HIF-1α),并观察其在原代培养海马神经细胞中的表达.方法:构建含人类HIF-1α基因的AAV载体质粒pSNAV-HIF-1α,转染BHK21细胞并选择培养获得的G418抗性细胞,即AAV载体细胞株,以重组单纯疱疹病毒感染此细胞株获得rAAV-HIF-1α,PCR技术鉴定病毒,地高辛标记的CMV探针点杂交方法测定重组病毒滴度,SDS-PAGE电泳测定病毒纯度,Western印迹检测目的蛋白的表达.结果:PCR证实rAAV-HIF-1α内含有人HIF-1α基因序列,病毒滴度为1×1012/ml,纯度大于98
作者:柴锡庆;刘凌云;郑龙;王俊霞;程桂花;杨涛
来源:第二军医大学学报 2007 年 28卷 6期