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目的 构建重组人缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)真核基因表达载体pSNAV-HIF-1α并观察其在原代培养海马神经细胞中的表达.方法 采用基因重组技术,将pBSKhHIF 1αT7原核表达载体上HIF-1α基因序列克隆至真核表达载体pSNAV 2.0,磷酸钙共沉淀法介导转染pSNAV-HIF-1α,采用Western blot检测HIF-1α蛋白.结果 酶切、PCR及DNA测序结果均表明成功构建了重组质粒pSNAV-HIF-1α,磷酸钙共沉淀法介导的pSNAV-HIF-1α质粒转染显著增加了海马神经细胞HIF-1α蛋白表达(P<0.05).结论 成功构建了pSNAV-HIF-1α,为进一步应用该基因进行临床基因治疗提供了实验依据.

作者:苏安英;单铁英;李玲;柴锡庆

来源:职业与健康 2010 年 26卷 21期

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作者:
苏安英;单铁英;李玲;柴锡庆
来源:
职业与健康 2010 年 26卷 21期
标签:
缺氧诱导因子-1α 原代培养 海马 转染
目的 构建重组人缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)真核基因表达载体pSNAV-HIF-1α并观察其在原代培养海马神经细胞中的表达.方法 采用基因重组技术,将pBSKhHIF 1αT7原核表达载体上HIF-1α基因序列克隆至真核表达载体pSNAV 2.0,磷酸钙共沉淀法介导转染pSNAV-HIF-1α,采用Western blot检测HIF-1α蛋白.结果 酶切、PCR及DNA测序结果均表明成功构建了重组质粒pSNAV-HIF-1α,磷酸钙共沉淀法介导的pSNAV-HIF-1α质粒转染显著增加了海马神经细胞HIF-1α蛋白表达(P<0.05).结论 成功构建了pSNAV-HIF-1α,为进一步应用该基因进行临床基因治疗提供了实验依据.