目的 采用兔骨髓来源的单个核细胞同步诱导分化为兔内皮祖细胞(EPCs)和平滑肌祖细胞(SPCs),研究其生物学特性,评估其作为组织工程化静脉瓣种子细胞的可能性.方法 梯度密度离心法获取兔骨髓血单个核细胞沉淀,分别用含5％胎牛血清(FBS)的EGM-2完全培养液向EPCs方向诱导培养;用含20 ng/mL血小板源性生长因子BB、5％FBS,不含血管内皮生长因子(VEGF)的EBM-2培养液向SPCs方向诱导培养.鉴定两种细胞的分化情况.结果 诱导的EPCs培养至10 d左右,细胞单层融合呈“铺路石”状;表达血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2)、血管性血友病因子(vWF)、CD133,不表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA);透射电镜可见细胞质内特征性Weibel-Palade小体;细胞生物学功能检测可见EPCs在基质胶上呈现血管状生长.诱导的SPCs培养至14d左右呈现血管平滑肌细胞“峰-谷”样生长特性;表达CD34、α-SMA,不表达vWF和VEGFR-2;在透射电镜下可见细胞内含有与细胞纵轴平行排列的肌丝;在基质胶上不规则生长.结论 兔骨髓血梯度密度离心得到的单个核细胞可同步诱导分化为EPCs和SPCs,为构建组织工程化静脉瓣提供了经济且可简便获取的种子细胞.
作者：张永珍；李文芳；樊新生；马小华；吴绪敏；张传森
来源：第二军医大学学报 2014 年 35卷 1期
