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目的 探讨芦荟大黄素(aloe emodin,AE)介导的光动力(aloe emodin-photodynamic therapy,AE-PDT)诱导骨肉瘤MG63细胞产生自噬,并探讨自噬和凋亡的关系.方法 将细胞分为AE-PDT对照组(Control组、AE组、LED组)和AE-PDT实验组.AE-PDT作用于人骨肉瘤MG63细胞后,采用CCK-8法检测细胞活性,2',7'-二氯荧光二乙酸盐(2',7'-dichlorofluorescin diacetate,DCFH-DA)荧光检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,单丹磺酰尸胺(monodansylcadaverin,MDC)染色检测细胞的自噬小体,透射电镜观察细胞的自噬体,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western印迹检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)和Beclin-1的表达.结果 AE-PDT能明显抑制人骨肉瘤MG63细胞的活性,且其抑制作用呈芦荟大黄素浓度-光动力能量剂量依赖性.AE-PDT实验组细胞内ROS水平和自噬小体均较3个对照组增高;透射电镜下可见典型自噬体;ADPDT能诱导细胞产生自噬和凋亡,3-甲基腺嘌呤抑制自噬后能增加细胞的凋亡率(P<0.05);Western印迹检测LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1/β-actin的表达高于阴性对照组.结论 AE-PDT能诱导骨肉瘤MG63细胞产生自噬.AE-PDT作用早期,自噬能延缓凋亡的发生可能起保护性作用.

作者:涂平华;李开庭;陈青;欧云生;白定群

来源:第二军医大学学报 2014 年 35卷 12期

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作者:
涂平华;李开庭;陈青;欧云生;白定群
来源:
第二军医大学学报 2014 年 35卷 12期
标签:
芦荟大黄素 光动力疗法 骨肉瘤 自噬 aloe emodin photodynamic therapy osteosarcoma autophagy
目的 探讨芦荟大黄素(aloe emodin,AE)介导的光动力(aloe emodin-photodynamic therapy,AE-PDT)诱导骨肉瘤MG63细胞产生自噬,并探讨自噬和凋亡的关系.方法 将细胞分为AE-PDT对照组(Control组、AE组、LED组)和AE-PDT实验组.AE-PDT作用于人骨肉瘤MG63细胞后,采用CCK-8法检测细胞活性,2',7'-二氯荧光二乙酸盐(2',7'-dichlorofluorescin diacetate,DCFH-DA)荧光检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,单丹磺酰尸胺(monodansylcadaverin,MDC)染色检测细胞的自噬小体,透射电镜观察细胞的自噬体,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western印迹检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)和Beclin-1的表达.结果 AE-PDT能明显抑制人骨肉瘤MG63细胞的活性,且其抑制作用呈芦荟大黄素浓度-光动力能量剂量依赖性.AE-PDT实验组细胞内ROS水平和自噬小体均较3个对照组增高;透射电镜下可见典型自噬体;ADPDT能诱导细胞产生自噬和凋亡,3-甲基腺嘌呤抑制自噬后能增加细胞的凋亡率(P<0.05);Western印迹检测LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1/β-actin的表达高于阴性对照组.结论 AE-PDT能诱导骨肉瘤MG63细胞产生自噬.AE-PDT作用早期,自噬能延缓凋亡的发生可能起保护性作用.