目的构建查菲埃立克体特异性表面抗原P120基因的原核表达质粒，并使该基因在E.coli中高效表达。方法依据查菲埃立克体P120基因序列设计一对特异性引物，用PCR从查菲埃立克体的基因组中扩增含有编码P120抗原决定簇的基因片段，而后将PCR产物用T载体克隆。用酶将PCR产物从T载体切下，将它定向插入原核表达质粒PET11C构建PET11C/p120重组质粒；用重组质粒转化E.coli BL21（DE3）。结果从DNA片断中扩增出一约1 119 bp产物，经测序为查菲埃立克体p120基因。PET11C/p120重组质粒转化的E.coli在IPTG的诱导下产生一分子量为41 000的天然蛋白，它的产量占细菌蛋白总量的28
作者：蹇锐；温博海
来源：第三军医大学学报 2001 年 23卷 8期
