目的提高昆明小鼠胚胎干细胞(ES细胞)建株的成功率.方法收集小鼠3.5 d的囊胚培养,用小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层,形成的ES细胞样集落,经两次亚克隆分离培养ES细胞;进行相差显微镜观察、碱性磷酸酶染色和体内外分化能力鉴定.结果获得两个稳定ES细胞集落,传至第11代.ES细胞呈集落样生长,碱性磷酸酶染色强阳性,体外分化的细胞沿拟胚体外向性生长,形态多样,在体分化可形成来源于3个胚层的组织.结论两次亚克隆法获得的细胞具有ES细胞主要的生物学性状,有助于提高昆明小鼠ES细胞建株的能力.
作者：秦茂林；蔡文琴；姚忠祥
来源：第三军医大学学报 2001 年 23卷 9期
