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目的制备兔抗人脂多糖结合蛋白(LBP)多抗,并研究其生物学特性.方法用LBP基因的真核表达载体pEFBOS-LBP作为抗原免疫制备兔抗人LBP的抗血清.用饱和硫酸铵盐析纯化后,通过ELISA检测抗体的效价;Western blot鉴定其特异性;流式细胞术观察LBP及其抗体对荧光标记脂多糖(LPS)与单核细胞结合的影响;ELISA检测LBP及其抗体对LPS诱导肺泡巨噬细胞分泌TNFα的影响.结果用LBP基因免疫制备的兔抗LBP多抗与LBP具有良好的结合活性;有较高的效价;LBP增强LPS与单核细胞结合的作用能被该抗体阻断;LBP增强LPS诱导肺泡巨噬细胞分泌TNFα的作用也能被该抗体阻断.结论用LBP基因免疫制备的兔抗人LBP多抗具有较好的生物学特性.

作者:李永旺;麻莉;张德明;毛宝龄;钱桂生;徐剑铖;侯一峰

来源:第三军医大学学报 2002 年 24卷 11期

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李永旺;麻莉;张德明;毛宝龄;钱桂生;徐剑铖;侯一峰
来源:
第三军医大学学报 2002 年 24卷 11期
标签:
脂多糖结合蛋白 抗体 脂多糖
目的制备兔抗人脂多糖结合蛋白(LBP)多抗,并研究其生物学特性.方法用LBP基因的真核表达载体pEFBOS-LBP作为抗原免疫制备兔抗人LBP的抗血清.用饱和硫酸铵盐析纯化后,通过ELISA检测抗体的效价;Western blot鉴定其特异性;流式细胞术观察LBP及其抗体对荧光标记脂多糖(LPS)与单核细胞结合的影响;ELISA检测LBP及其抗体对LPS诱导肺泡巨噬细胞分泌TNFα的影响.结果用LBP基因免疫制备的兔抗LBP多抗与LBP具有良好的结合活性;有较高的效价;LBP增强LPS与单核细胞结合的作用能被该抗体阻断;LBP增强LPS诱导肺泡巨噬细胞分泌TNFα的作用也能被该抗体阻断.结论用LBP基因免疫制备的兔抗人LBP多抗具有较好的生物学特性.