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目的构建用于核糖核酸酶保护法的MD-2转录质粒并制备反义RNA探针.方法 PCR扩增目的片段,并定向亚克隆至pSP72质粒T7启动子下游的多克隆位点,以T7 RNA聚合酶转录合成反义RNA探针.结果亚克隆插入的片段经测序、酶切鉴定,序列及方向完全正确,成功制备了用于的反义RNA探针.结论成功地制备了用于核糖核酸酶保护法的MD-2转录模板和探针,为深入研究内毒素信号受体相关机制以及MD-2的基因表达创造了必要的条件.

作者:陈永华;李昌麟;王韵;蒋建新;朱佩芳;张宗梁

来源:第三军医大学学报 2003 年 25卷 20期

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作者:
陈永华;李昌麟;王韵;蒋建新;朱佩芳;张宗梁
来源:
第三军医大学学报 2003 年 25卷 20期
标签:
RNA探针 核糖核酸酶保护法
目的构建用于核糖核酸酶保护法的MD-2转录质粒并制备反义RNA探针.方法 PCR扩增目的片段,并定向亚克隆至pSP72质粒T7启动子下游的多克隆位点,以T7 RNA聚合酶转录合成反义RNA探针.结果亚克隆插入的片段经测序、酶切鉴定,序列及方向完全正确,成功制备了用于的反义RNA探针.结论成功地制备了用于核糖核酸酶保护法的MD-2转录模板和探针,为深入研究内毒素信号受体相关机制以及MD-2的基因表达创造了必要的条件.