目的探讨人端粒酶蛋白催化活性亚单位(Human telomerase reverse transcriptase, hTRT)反义基因转染对HepG2肝癌细胞株端粒酶亚单位及细胞周期的影响.方法采用流式细胞仪检测hTRT正义基因转染的HepG2细胞(HepG2-S)以及hTRT反义基因转染的HepG2细胞(HepG2-AS)的细胞周期,采用RT-PCR法检测上述细胞hTRT、端粒酶RNA(hTR)、端粒酶相关蛋白1(TP1)以及c-myc和bcl-2基因的变化,同时采用Western blot检测hTRT蛋白质的变化.结果 HepG2-AS出现G0/G1期阻滞,增殖指数增加,凋亡率亦明显增加,进一步研究发现,HepG2-AS端粒酶亚单位hTRT在蛋白质和mRNA水平均表达减少,而TP1、hTR无明显变化,bcl-2和c-myc mRNA的表达亦明显下调.结论 hTRT反义基因不仅可以下调HepG2细胞 hTRT mRNA和蛋白质的表达,而且可以下调c-myc、bcl-2 mRNA的表达,从而一方面降低端粒酶活性,另一方面一定程度增加凋亡细胞的比率,抑制肝癌细胞的生长.
作者：杨仕明；房殿春；杨金亮；罗元辉；鲁荣；刘为纹
来源：第三军医大学学报 2003 年 25卷 24期
