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目的构建干扰素诱导蛋白P56及其各种缺失突变体的酵母表达质粒.方法干扰素诱导HT1080,提取mRNA、RT-PCR获取P56全长及各种缺失突变体的cDNA,以酵母表达质粒pCADT7为载体,构建重组质粒.结果诱导的HT1080中抽提出P56的mRNA、RT-PCR扩增出P56全长cDNA片段,大小与预期值一致约1 500 bp,以P56全长cDNA为模板PCR获得P56各种缺失突变体并插入pCADT7;正确构建了各种pGADT7-P56酵母表达重组质粒.这些质粒DNA测序结果与理论值一致.结论P56全长及各种缺失突变体酵母表达质粒的成功构建,为进一步研究P56功能奠定了基础.

作者:邓正阳;李淑蓉;王蒙;王军平;廖兰;徐建明;蒋建新;黄跃生;粟永萍

来源:第三军医大学学报 2004 年 26卷 7期

知识库介绍

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作者:
邓正阳;李淑蓉;王蒙;王军平;廖兰;徐建明;蒋建新;黄跃生;粟永萍
来源:
第三军医大学学报 2004 年 26卷 7期
标签:
干扰素 P56 RT-PCR 重组质粒
目的构建干扰素诱导蛋白P56及其各种缺失突变体的酵母表达质粒.方法干扰素诱导HT1080,提取mRNA、RT-PCR获取P56全长及各种缺失突变体的cDNA,以酵母表达质粒pCADT7为载体,构建重组质粒.结果诱导的HT1080中抽提出P56的mRNA、RT-PCR扩增出P56全长cDNA片段,大小与预期值一致约1 500 bp,以P56全长cDNA为模板PCR获得P56各种缺失突变体并插入pCADT7;正确构建了各种pGADT7-P56酵母表达重组质粒.这些质粒DNA测序结果与理论值一致.结论P56全长及各种缺失突变体酵母表达质粒的成功构建,为进一步研究P56功能奠定了基础.