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目的:构建小鼠Th1细胞特异性转录因子T-bet基因的腺相关病毒载体.方法:利用RT-PCR方法,从Balb/C小鼠脾细胞的mRNA中扩增T-bet基因全长cDNA,经测序证实后插入Pzac2.1质粒,用磷酸钙沉淀法,与pAddeltaF6及p5E18质粒共转染293细胞,包装成重组的病毒颗粒,并通过抽提病毒DNA进行PCR扩增鉴定重组病毒的形成,设立eGFP基因为对照.结果:1592 bp的小鼠T-bet基因被成功克隆,分析表明,与Genbank中发表的序列相比具有99.8

作者:王锁英;许化溪;王胜军;黄新祥;王文斌;陈巧林;马斌;眭建;姜旭淦;胡嘉波

来源:南京医科大学学报(自然科学版) 2006 年 26卷 3期

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作者:
王锁英;许化溪;王胜军;黄新祥;王文斌;陈巧林;马斌;眭建;姜旭淦;胡嘉波
来源:
南京医科大学学报(自然科学版) 2006 年 26卷 3期
标签:
T-bet RT-PCR 基因克隆 重组质粒 腺相关病毒载体
目的:构建小鼠Th1细胞特异性转录因子T-bet基因的腺相关病毒载体.方法:利用RT-PCR方法,从Balb/C小鼠脾细胞的mRNA中扩增T-bet基因全长cDNA,经测序证实后插入Pzac2.1质粒,用磷酸钙沉淀法,与pAddeltaF6及p5E18质粒共转染293细胞,包装成重组的病毒颗粒,并通过抽提病毒DNA进行PCR扩增鉴定重组病毒的形成,设立eGFP基因为对照.结果:1592 bp的小鼠T-bet基因被成功克隆,分析表明,与Genbank中发表的序列相比具有99.8