目的 探讨原代培养的人绒毛膜滋养层细胞感染乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)的可能性及规律.方法 采用胰酶/DNA酶序贯消化及Percoll密度梯度离心分离纯化人绒毛膜滋养层细胞后,采用血清直接感染法进行滋养层细胞的HBV感染,同时通过与对正常成人肝细胞株L02细胞的HBV感染后及转染HBV的肝癌细胞株(HepG2.2.15)的传代培养比较,实时荧光定量PCR检测培养上清的HBV DNA;并用透射电镜观察HBV感染后滋养层细胞的超微结构改变及其在滋养层细胞中的定位.结果 原代培养的滋养层细胞感染HBV后释放至培养上清中的HBV DNA于感染后48~72 h达高峰,而L02细胞则于感染后12~24 h达高峰,HepG2.2.15细胞株感染后则一直攀升.透射电镜观察HBV感染后滋养层细胞超微结构发生了明显改变,主要表现为溶酶体大量增生,出现空泡状结构,并可观察到病毒样颗粒,主要定位于细胞核周.结论 HBV可以感染滋养层细胞,定位于核周并导致滋养层细胞的超微结构改变.
作者:李俊男;王宇明;史常旭;梁志清;常青;张琴;陈黎
来源:第三军医大学学报 2007 年 29卷 14期