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目的 建立乙型肝炎病毒(HBV)体外感染人绒毛膜癌滋养层细胞(JEG3)模型,探讨HBV宫内感染机制.方法 应用HBV阳性且高载量的血清,感染JEG3细胞.应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测感染后细胞上清液和细胞内的HBV载量;应用ELISA方法检测感染后不同时间、不同代次上清液的HBsAg、HBeAg浓度;应用SP免疫组化检测感染细胞内HBsAg、HBeAg的表达.结果 感染初代的JEG3细胞,随着时间增加病毒载量亦增加.传代后细胞及上清中的HBV载量随传代次数增加逐渐降低,5代后检测均为阴性:感染初代上清液HBsAg含量随时间增加,1:20 h含量最高.传代细胞的上清液HBsAg检测1~4代为阳性,但浓度逐渐降低,5代后均为阴性.上清液的HBeAg检测,各时间点、各代均为阴性;1、2、3、4代细胞HBsAg、HBcAg染色可见阳性细胞.结论 HBY可以在体外感染滋养层细胞,且能在传代细胞中有持续的表达.感染过程中参与调控的相关细胞因子及HBV复制的持续与否有待进一步探讨.

作者:马力;穆桂玲;王心竹;张健;赵桂珍;王兆荃

来源:中国医科大学学报 2008 年 37卷 5期

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作者:
马力;穆桂玲;王心竹;张健;赵桂珍;王兆荃
来源:
中国医科大学学报 2008 年 37卷 5期
标签:
乙型肝炎病毒 绒毛膜癌滋养层细胞 胎盘滋养层 感染 实时定量PCR
目的 建立乙型肝炎病毒(HBV)体外感染人绒毛膜癌滋养层细胞(JEG3)模型,探讨HBV宫内感染机制.方法 应用HBV阳性且高载量的血清,感染JEG3细胞.应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测感染后细胞上清液和细胞内的HBV载量;应用ELISA方法检测感染后不同时间、不同代次上清液的HBsAg、HBeAg浓度;应用SP免疫组化检测感染细胞内HBsAg、HBeAg的表达.结果 感染初代的JEG3细胞,随着时间增加病毒载量亦增加.传代后细胞及上清中的HBV载量随传代次数增加逐渐降低,5代后检测均为阴性:感染初代上清液HBsAg含量随时间增加,1:20 h含量最高.传代细胞的上清液HBsAg检测1~4代为阳性,但浓度逐渐降低,5代后均为阴性.上清液的HBeAg检测,各时间点、各代均为阴性;1、2、3、4代细胞HBsAg、HBcAg染色可见阳性细胞.结论 HBY可以在体外感染滋养层细胞,且能在传代细胞中有持续的表达.感染过程中参与调控的相关细胞因子及HBV复制的持续与否有待进一步探讨.